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阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)方法介紹

更新時(shí)間:2018-09-25  |  點(diǎn)擊率:1333

傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方法

傳統(tǒng)的阪崎腸桿菌分離檢測(cè)方法,依賴于生化和形態(tài)學(xué)特點(diǎn),上通常以美國(guó) FDA 頒布的“嬰兒配方奶粉中阪崎腸桿菌的分離計(jì)數(shù)”作為經(jīng)典方法。2008年我國(guó)也制定了阪崎腸桿菌檢驗(yàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),并于2010 年、2016年進(jìn)行了修訂,規(guī)范了阪崎腸桿菌檢測(cè),目前依據(jù)我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)GB4789.40—2016檢測(cè)阪崎腸桿菌。

 

檢驗(yàn)程序:檢樣 100 g(mL)+ BPW 稀釋液 900mL→ 1 mL+Mlst-Vm→阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基→挑取疑似菌落→TSA→挑取黃色菌→生化鑒定→報(bào)告。

 

阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基,可選用上HiMedia公司生產(chǎn)的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):MV1577),該培養(yǎng)基適用于從食物、牛奶和奶制品中分離鑒定阪崎克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌),采用無(wú)瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)的植物蛋白胨取代了動(dòng)物蛋白胨,植物源成分,品質(zhì),值得信賴。若檢測(cè)進(jìn)出口食品依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)可選用另一款崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):MV1641),該培養(yǎng)基遵循ISO /TS 22964: 2006。

 

 

基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜檢驗(yàn)法

 

基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MAL-DITOF- MS)法是將被測(cè)樣品以一定的比例與基質(zhì)溶液相混合,利用脈沖激光照射激發(fā)基質(zhì),致使高分子生成分子離子以及分子離子的多聚體,在一時(shí)間飛行質(zhì)譜儀中加速與檢測(cè),結(jié)果被測(cè)高分子按質(zhì)量數(shù)的大小進(jìn)行分離,經(jīng)過處理形成質(zhì)量圖譜,通過軟件分析比較,篩選并確定出特異性(指紋) 圖譜,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)微生物種或菌株的區(qū)分和鑒定。但分析成本高,器價(jià)格及日常維護(hù)費(fèi)用貴。

 

分子生物學(xué)檢驗(yàn)方法

 

目前用于乳制品中的阪崎腸桿菌的分子生物學(xué)檢驗(yàn)方法包括普通PCR法(電泳法)、DNA環(huán)介導(dǎo)等恒擴(kuò)增(LAMP)檢驗(yàn)法和熒光 PCR 法等。這種方法克服了傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法的操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、不易分辨結(jié)果等缺點(diǎn)。也使得針對(duì)阪崎腸桿菌開展的快速檢測(cè)方法迅速發(fā)展。但采用該方法也存在需要樣品中測(cè)定菌濃度高、分析成本高、操作繁瑣,無(wú)法鑒定是否有活菌存在等缺點(diǎn)。

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