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新研究揭示不同細(xì)胞對(duì)胎牛血清的要求不同

更新時(shí)間:2023-12-13  |  點(diǎn)擊率:394

與傳統(tǒng)的動(dòng)物模型相比,體外的細(xì)胞培養(yǎng)模型相對(duì)操作簡便,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性也相對(duì)更高。.自20世紀(jì)50年代以來,胎牛血清作為常用、高效的添加物,在世界范圍內(nèi)被廣泛應(yīng)用于體外細(xì)胞培養(yǎng)。

 

胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長補(bǔ)充劑。

 

近日的一項(xiàng)研究,探究了細(xì)胞培養(yǎng)與胎牛血清的關(guān)系。

 

該項(xiàng)研究中,無論采用國產(chǎn)還是進(jìn)口的胎牛血清培養(yǎng)Sp2/0其細(xì)胞克隆數(shù)、細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞活率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).這與已有的研究結(jié)果相類似.究其原因可能是Sp2/0MDCK同屬細(xì)胞系,部分遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變,且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),能在體外培養(yǎng)條件下無限制地傳代,對(duì)血清的依賴降低,因此能在各類型血清中較好地生長增殖.研究中還發(fā)現(xiàn):進(jìn)口胎牛血清培養(yǎng)的豬胎兒成纖維細(xì)胞,其細(xì)胞克隆數(shù)、細(xì)胞數(shù)量和活率均極顯著高于國產(chǎn)胎牛血清(P<0.01)有科研人員利用不同來源胎牛血清培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)在使用FBS1培養(yǎng)過程中,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸死亡,而FBS2培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞不但能很快貼壁和迅速增殖,而且傳代培養(yǎng)后能保持很強(qiáng)的分裂增殖能力.推測(cè)可能是因?yàn)樨i胎兒成纖維細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞屬于原代細(xì)胞,保持了體內(nèi)的生物學(xué)特性.因不同來源胎牛血清,其采集方式與生產(chǎn)加工工藝不同,所含促細(xì)胞生長因子等活性物質(zhì)的組份與比例也有所不同,導(dǎo)致原代細(xì)胞的生長、增殖受血清來源影響較大。

 

不同來源胎牛血清質(zhì)量差異大,即使同一品牌、同一貨號(hào),因供血?jiǎng)游镄詣e、生理、營養(yǎng)等條件不同,也會(huì)存在批次間的差異。該研究利用豬胎兒成纖維細(xì)胞對(duì)同一品牌、同一貨號(hào),3個(gè)不同批次的胎牛血清進(jìn)行了測(cè)試,結(jié)果顯示:FBS2-1形成的細(xì)胞克隆小,且細(xì)胞克隆數(shù)極顯著低于FBS2-2FBS2-3P<0.01);培養(yǎng)10d后,FBS2-1的細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞活率極顯著低于FBS2-2FBS2-3P<0.01),雖然FBS2-2的細(xì)胞克隆數(shù)極顯著低于FBS2-3P<0.01),但是FBS2-2的細(xì)胞克隆大,且細(xì)胞數(shù)量極顯著高

FBS2-3P<0.01).該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)篩選出FBS2-2是豬胎兒成纖維細(xì)胞的適宜血清。

 

由此實(shí)驗(yàn)可以看出,不同細(xì)胞對(duì)于胎牛血清的要求不同,不同批次、品牌的胎牛血清培養(yǎng)效果也不盡相同,在選購時(shí),需要盡量選擇可提供試用服務(wù)的品牌,在小范圍內(nèi),對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),已選擇更符合實(shí)驗(yàn)要求的胎牛血清。


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