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實驗室使用O157顯色培養(yǎng)基,是如何操作的

更新時間:2021-12-24  |  點擊率:876
  O157顯色培養(yǎng)基的操作步驟:
  1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
  2、取25克樣品液加入225mlmEC肉湯或mTSB肉湯中,36℃增菌培養(yǎng)18-24小時;
  3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上,做2個平板;
  4、36℃培養(yǎng)18-24h,O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色;
  5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學試驗和全套生化試驗。
  注:必須在36℃培養(yǎng)24小時內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化。
  操作
  稱取瓶內(nèi)干粉,用1000ml蒸餾水或純水溶解,可按29.2g/L的比例擴大或縮小。
  將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中,充分攪拌溶解。
  加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌。如果用高壓滅菌鍋,不要加壓,加熱不能超過100℃?;旌衔镆部梢栽谖⒉t內(nèi)加熱,煮沸后,立即移出微波爐并輕輕攪拌,而后再移入微波爐繼續(xù)加熱,直至瓊脂等*溶解(大量氣泡代替泡沫產(chǎn)生,大約需要2分鐘)。
  將培養(yǎng)基冷卻至45-50℃后,傾倒于培養(yǎng)皿或試管中。
  注1:如果需要選擇性更強的培養(yǎng)基,可在48℃時加入亞碲酸鉀溶液,使?jié)舛葹?.5mg/l。
  注2:如果標本中含有較多的變形桿菌,可在48℃時加入頭孢克肟,使其濃度為0.025mg/l。
  注3:如果標本中含有較多的假單胞菌和/或氣單胞菌,可在48℃時加入西蘇羅錠(頭孢磺碇),使其濃度為5mg/l。
  
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