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支原體是細胞的“吸血鬼”嗎?

更新時間:2020-12-16  |  點擊率:938

支原體是一大群微生物,有150多個物種,它們共同特點是大小介于細菌和病毒之間,無細胞壁,形態(tài)呈高度多形性,可為圓形、絲狀或梨形。因而它們也被歸為柔膜體。

支原體直徑僅有0.10.3μm,并且變形能力大,故能通過濾菌器。支原體與其他細菌不同之處還在于其胞膜中含有膽固醇或其他甾醇,這種特性使支原體膜更具柔順性, 對于物理因素, 如壓力、滲透壓、脫水的抵抗力很大。

支原體多吸附或散在于細胞表面和細胞之間。自Robinson1956年*報道細胞培養(yǎng)中存在支原體污染以來,國內(nèi)外關(guān)于支原體污染細胞和疫苗等生物制品的報道屢見不鮮。其中95%以上的污染支原體為口腔支原體(Morale)、精氨酸支原體(Marginini)、發(fā)酵支原體(Mfermentans)、萊氏無膽甾原體(Acholeplasma laidlawii)和豬鼻支原體(MhyorhinitiS)五種。

支原體倍增時間是19小時。在體外培養(yǎng)基中生長緩慢。

大部分支原體能吸附在細胞表面,有個別支原體物種能進入到細胞內(nèi),如發(fā)酵支原體、生殖支原體和肺炎支原體,不僅是可被吞噬到單核細胞中,而且可存在于上皮細胞。并且在1992年發(fā)現(xiàn)存在有滲透支原體M. penetrans。

 

. 支原體電鏡照片

支原體污染細胞培養(yǎng)物后,使細胞發(fā)生病變,這主要是因為支原體消耗了營養(yǎng)和細胞代謝的基礎(chǔ)成分,包括核酸前體、氨基酸、維生素、脂質(zhì)、膽固醇。由于支原體的低代謝能力和高數(shù)量,這些化合物會非??斓乇幌牡?。由于這些成分的非氧化性降解和產(chǎn)酸的積累,培養(yǎng)基的pH會發(fā)生下降。還有些支原體(如精氨酸支原體、豬鼻支原體)能水解精氨酸,產(chǎn)氨導(dǎo)致pH值升高。支原體中由于存在精氨酸脫氨酶活性,會使細胞生長變慢甚至發(fā)生凋亡。

由于細胞的精氨酸被支原體剝奪,細胞的染色體會發(fā)生畸變,因為精氨酸是組蛋白的組成成分。同時,真核細胞的DNARNA會被支原體產(chǎn)生的核酸外切酶和內(nèi)切酶降解,這在支原體污染的淋巴細胞和腫瘤上皮細胞中被觀察到。支原體還會干擾病毒的產(chǎn)生和復(fù)制。

支原體還會破壞細胞膜的完整性,影響細胞信號傳遞,干擾膜受體的功能,改變信號傳遞。在單克隆抗體制備中,骨髓瘤或雜交瘤細胞因支原體的污染而導(dǎo)致融合失敗或抗體分泌能力下降以至喪失。

細胞培養(yǎng)物被支原體污染后生長減慢,產(chǎn)生細胞病變,表現(xiàn)為細胞體積增大,碎片增多,在細胞質(zhì)中產(chǎn)生一些顆粒;細胞內(nèi)病毒繁殖受阻,使細胞形成空斑。光鏡下形成不正常密度生長的單層,貼壁細胞形成“流沙樣”脫落、裂解。某些支原體可在侵入細胞8h使線粒體膨脹,繼而被破壞,細胞核萎縮呈空泡化,細胞微管解聚。

 

以上可見,無論是細胞科研,生物藥生產(chǎn),還是細胞工業(yè),支原體檢查都是重要一環(huán)。其中,支原體PCR檢測試劑盒和支原體qPCR檢測試劑盒是常用方法,靈敏度高,覆蓋支原體物種廣泛,操作簡便,節(jié)省時間,在確保細胞無污染和產(chǎn)品質(zhì)控方面,具有*的意義。

 

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